中国协以及医科大学博士钻研生恳求之HSL基因表白
中国协以及医科大学博士论文中文摘要以激素敏理性脂肪酶为靶点的中国钻研做作减肥药物的开始筛选目的:消瘦症是危害人类瘦弱的全天下性疾病。消瘦削减人类患其余疾病的协及危害性,搜罗高血压,医科因表血脂颇为( 如高胆固醇,大学高甘油三酯) ,博士白2型糖尿病,生恳冠心病,中国钻研中风,协及胆囊疾病,医科因表骨关键关键炎,大学就寝呼吸停息,博士白子宫内膜癌,生恳乳腺癌,中国钻研结肠癌等肿瘤以及神思疾患。协及红色脂肪机关中脂肪的医科因表分解以及分解与消瘦症的爆发、睁开关连亲密。削减脂肪分解有助于削减脂肪细胞中甘油三酯的贮存。激素敏理性脂肪酶( H sL)是脂肪分解历程中的主要限速酶,在脂肪分解历程中起紧张的熏染。经由细胞转染技术,将含人脂肪机关H sL基因启动子的荧光素酶表白质粒晃动转染小鼠3T3一L1前脂肪细胞中,并以此为工具,从泛滥中药做作化合物中追寻对于H sL启动子活性有影响的药物,再经由植物试验审核药物对于高脂伙食昆明小鼠体重、糖脂代谢的干涉熏染,及对于小鼠体内红色脂肪机关H sL基因表白的影响,品评辩说以H SL为减肥药物筛选靶点的可行性。措施:1.建树含人脂肪机关H sL基因启动子的荧光素酶表白质粒的晃动转染小鼠3T3-L1前脂肪细胞株:以人基因组D N A为模版,克隆人脂肪机关H sL基因启动子序列( 一697.十53bp) ,将该片断插入到含荧光素陈说基因的质粒载体pG L3-B踮i c-L1J c中,患上到含人H sL基因启动子序列( .697-+53bp) 的荧光素酶表白质粒。而后用脂质体转染法,将该质粒转染到小鼠3T3-Ll 前脂肪细胞中,经筛选药物G eneti ci n( G 418) 筛选,取患上表白荧光素酶的晃动转染单克隆小鼠3T3.L1前脂肪细胞株。2.50%乙醇中药提取液( l i nesem edi cal herbs,Ec瑚)对于人HsL基因启动予活性的影响:含人H SL基因启动子序列的荧光素酶陈说质粒,其荧2
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